，俗名大叶白麻，喜生于盐碱荒地、沙漠及戈壁荒滩，主要分布在新疆塔里木盆地、甘肃河西走廊、内蒙古西部和青海柴达木盆地，其中新疆的分布面积约为，产量很高，是新疆很有挖掘价值的药材资源之一。白麻在《中国植物志》《新疆中草药》《尔药志》中均有记载，但未被《中国药典》收载。《尔药志》记载白麻清热凉血、利尿消肿、行气凉肝、镇静安神，用于头晕、心悸、神经衰弱、高血压及肝硬化引起的腹水，与《中国药典》收载品种罗布麻的药理活性类似。植物分类中，白麻最早被纳入夹竹桃科白麻属，后又被列入夹竹桃科罗布麻属，与罗布麻同属。在新疆，白麻会被当作罗布麻的替代品使用 ［，然而其能否完全作为代用品也一直存在争议。目前，已有学者对比研究了白麻和罗布麻的化学成分，发现二者化学成分同中有异 ［。但是，尚未同时比较白麻和罗布麻的化学成分及药理活性，未能阐释物质基础的差异对两种药材的药理活性有怎样的影响。

　　白麻和罗布麻都含有黄酮类、多酚类、香豆素、长链脂肪酸酯和甾醇类等化学成分 ［5-7］，具有降血压、调血脂、抗抑郁和抗衰老等活性 ［8-10］，其中降血压和调血脂是二者最主要的活性。高血压和高血脂都属于炎症性疾病范畴，越来越多的证据表明炎症与高血压和高血脂的发生发展都密切相关。高血压患者普遍存在高敏C反应蛋白、细胞因子和各种补体途径的产物等炎症标志物的升高 ［11-12］。全身系统和中枢神经系统的低水平慢性炎症也被认为有助于高血压的生理病理。临床前研究的新证据还表明，高血压可以通过系统性炎症改变脑血管的结构和功能，损害负责维持大脑稳态的基本机制 ［13］，因而是血管性认知障碍的危险因素之一。高血脂是指血液中胆固醇、胆固醇酯、磷脂和三酰甘油水平升高。研究发现，非空腹残留胆固醇升高可以引起炎症和缺血性心脏病 ［14］，并且血浆总胆固醇与肝脏炎症发展之间存在相关性 ［15］。所以，抑制炎症是缓解高血压和高血脂的途径之一。武炜等 ［16-17］已报道了罗布麻的抗炎活性，但是白麻的抗炎活性尚未见报道。因此，本研究以白麻和罗布麻分别制备提取物和精制物，在分析4种样品化学成分的基础上，采用小鼠棉球肉芽肿模型比较其抗炎活性，一方面明确白麻的抗炎活性，另一方面也为阐释2种药材化学成分与药理活性之间的关系提供线索。

　　白麻叶（新疆乌鲁木齐市济康大药房，批号20170814）和罗布麻叶（阿勒泰戈宝茶股份有限公司，批号16052314），由新疆尔自治区中药民族药研究所朱军研究员鉴定，分别为夹竹桃科罗布麻属白麻A. pictumSchrenk的叶和夹竹桃科罗布麻属罗布麻A. venetumLinn.的叶。（浙江仙琚制药股份有限公司，批号161264，规格每片0.75 mg）；组胺（Sigma公司，批号101834375）；5-羟色胺盐酸盐（Sigma公司，批号1002442593）；前列腺素E 2（PGE 2）试剂盒（上海心语生物科技有限公司，批号201711）；金丝桃苷（质量分数94.3%，批号11）、芦丁（质量分数91.9%，批号10）和异槲皮苷（质量分数92.9%，批号11）购于中国食品药品检定研究院；白麻苷（质量分数≥98%，批号P09J6R1）购于上海源叶生物科技有限公司；紫云英苷（质量分数≥98%，批号16030904）购于河南省标物生物科技有限公司。

　　SPF级昆明种小鼠，18～22 g，8周龄，由新疆医科大学提供，实验动物生产许可证号SCXK（新）2016-0003，动物实验经新疆尔自治区中药民族药研究所实验动物伦理委员会批准（编号IACUC2017-08-001）。

　　取白麻叶和罗布麻叶，20倍量60%乙醇溶液回流提取2次，每次1.5 h，合并提取液，浓缩、干燥，即得白麻叶提取物（APLE）、罗布麻叶提取物（AVLE），收率分别为22.23%、27.00%。以每毫升药液0.03 g药材的浓度过HPD300大孔树脂柱，水洗除杂后以60%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，浓缩、干燥，即得白麻叶精制物（APLP）、罗布麻叶精制物（AVLP），收率分别为7.08%、8.50%。

　　2.2.3质谱条件ESI离子源：雾化气压379.22 kPa，辅助气压379.22 kPa，气帘气压241.32 kPa，温度550 ℃，喷雾电压5 500 V（正离子模式）或-4 000 V（负离子模式）。轰击能量40 eV，碰撞能差20 eV。利用控制软件（Analyst TF 1.7，AB Sciex）基于IDA功能进行一级、二级质谱数据采集。在每个数据采集循环中，筛选出强度最强且大于100的分子离子采集二级质谱数据。使用Progenesis QI软件导入原始数据，进行保留时间矫正、峰识别、峰提取、峰积分和峰对齐等，利用自建二级质谱数据库及相应裂解规律匹配法对含有MSMS数据的峰进行鉴定。

　　按照课题组前期建立的方法 ［18-19］，测定APLE、APLP、AVLE和AVLP样品中白麻苷、芦丁、异槲皮苷、金丝桃苷和紫云英苷的含量。

　　2.4.1急性毒性实验SPF级昆明种小鼠40只，每组10只，雌雄各半。以最大溶解度给药，APLE、APLP、AVLE和AVLP的给药浓度分别为0.400 0、0.375 0、0.400 0、0.333 7 g·mL-1，ig体积40 mL·kg-1，每天1次，连续14 d。观察小鼠死亡情况，分别在第1、7、14天称量并记录各组小鼠体质量。14 d后，处死小鼠，解剖观察小鼠主要脏器有无异常。

　　2.4.2模型制备 ［20］及分组给药SPF级雄性昆明种小鼠110只，以脱毛器脱去小鼠两侧腋下的毛，10%水合氯醛浅麻醉小鼠，碘伏消毒，在无菌条件下切开小鼠两侧腋下皮肤，植入备用棉球（灭菌、称质量），缝合切口，缝合后，在伤口处涂50 000 U·mL-1的链霉素。

　　参考文献报道方法 ［21-22］设置模型组，（阳性药，5 mg·kg-1）组，APLE、APLP、AVLE和AVLP高、低剂量（“2.4.1”项得到的最大耐受剂量的1/10、1/20）组，模型组给予生理盐水，每天ig给药1次，连续给药7 d。

　　2.4.3样品对肉芽肿指数与肾上腺指数的影响末次给药1 h后，摘眼球取血，断颈处死小鼠，在原缝合处剪开皮肤，剥离并取出棉球肉芽组织，置于已称质量洁净平皿中，恒温干燥箱60 ℃开盖干燥12 h后称质量，计算肉芽肿指数。剖取小鼠双侧肾上腺，分离肾上腺周围附着物，称质量，计算肾上腺指数。

　　2.4.4样品对血清组胺、5-羟色胺和PGE 2水平的影响制备血清标本，HPLC法测定样品对血清组胺、5-羟色胺水平的影响 ［23-26］，并按照试剂盒说明书检测PGE 2水平。

　　从4种样品中鉴定出化学成分97个，APLE、APLP、AVLE和AVLP中分别鉴定出化学成分89、90、81和77个，结果见图1、表1。鉴定出的97个化学成分中，绝大多数是黄酮、黄酮糖苷和黄烷酮，并有少量生物碱、香豆素和萜类等成分，与文献报道基本一致 ［27］。白麻叶和罗布麻叶的化学成分总体上相似，但二者也有各自的特征成分。比如，仅在白麻叶样品中鉴定出2-吲哚酮、根皮苷、芒柄花苷、黄芩素6-甲基醚-7-葡萄糖苷酸、异补骨脂素、二氢欧山芹醇乙酸酯、甲基鼠李素、8-异戊烯基柑橘素、3-甲氧基-4-羟基笨乙二醇硫酸盐、白麻苷和棉花皮素3-甲醚；只在罗布麻叶样品中鉴定出甲羟戊酸内酯、木犀草素7- O -β- D -葡萄糖苷酸、淫羊藿苷和1-（4-羟基苯基）乙酮。这一结果不仅说明白麻叶和罗布麻叶的化学成分同中有异，而且可以看出白麻叶的化学成分相比罗布麻叶更丰富。

　　HPLC分析中，白麻苷只在2个白麻样品中检出，芦丁和异槲皮苷在4个样品中均有检出，与UPLC/Q-TOF/MS结果一致，一定程度上验证了化学成分鉴定的可靠性，结果见表2。APLE中虽未检测到金丝桃苷和紫云英苷，但这2个成分在APLP中均有检出，造成这一结果的原因可能是HPLC检测灵敏度低。除了“3.1”项所述化学成分的组成差异，白麻叶和罗布麻叶在共有成分的含量上也有较为明显的差别。比如APLP中芦丁、异槲皮苷、金丝桃苷和紫云英苷的质量分数分别为0.30%、7.44%、0.14%、0.67%，而AVLP中的质量分数分别为9.11%、13.01%、1.21%、1.06%，分别是APLP的30.37、1.75、8.64、1.58倍。

　　3.3.1样品最大耐受剂量连续观察14 d，小鼠体质量正常增长，未见死亡。14 d后处死小鼠，解剖大体观察，各脏器未见明显异常。APLE、APLP、AVLE和AVLP的最大耐受剂量分别为16.00、15.00、16.00、13.35 g·kg-1，折算生药量分别为71.97、211.86、59.26、157.06 g·kg-1。APLP和AVLP的最大耐受剂量折算生药量分别是提取物APLE和AVLE的2.94倍和2.65倍，说明精制工艺不会增加样品的急性毒性反应。后续实验以最大耐受剂量的1/10、1/20分别作为样品的高、低剂量。

　　3.3.2样品对小鼠肉芽肿的影响如表3所示，与模型组比较，阳性药显著降低肉芽肿指数（P＜0.01），抑制率为28.08%；APLP高、低剂量组肉芽肿指数均显著降低（P＜0.05），抑制率分别为25.79%、21.75%，高于APLE的抑制率，说明APLP具有抗炎作用，精制实现了富集白麻叶抗炎活性成分的目的。AVLE、AVLP组肉芽肿指数有下降趋势，但与模型组比较差异无统计学意义。虽然在高剂量下，AVLP比AVLE对肉芽肿的抑制率略低，但在低剂量下明显提高，说明精制对于富集罗布麻叶抗炎活性成分有一定意义。同时，AVLP对肉芽肿的抑制率明显低于APLP，说明罗布麻叶和白麻叶的抗炎活性成分可能并不相同，才会导致经过相同工艺制备的精制物在活性上有差异。

　　3.3.3样品对肾上腺指数的影响与模型组比较，阳性药组和各样品组肾上腺指数差异均无统计学意义，结果见表4。

　　3.3.4样品对血清组胺和5-羟色胺水平的影响如表5所示，与模型组比较，阳性药显著降低组胺和5-羟色胺水平（P＜0.05）；APLP高剂量组组胺和5-羟色胺水平显著降低（P＜0.05），低剂量组5-羟色胺水平显著降低（P＜0.01）。其他给药组组胺和5-羟色胺水平有降低趋势，但差异无统计学意义。

　　3.3.5样品对PGE 2的影响总体上，4个样品抑制小鼠肉芽肿以及血清组胺、5-羟色胺的活性都是高剂量组优于低剂量组，因此选择高剂量继续考察各样品对血清PGE 2的影响。如表6所示，与模型组比较，阳性药、APLE、APLP都可以下调PGE 2水平，但差异无统计学意义；与白麻叶样品不同的是，AVLE、AVLP均显著升高PGE 2水平（P＜0.05），这一结果再次说明白麻和罗布麻样品的化学成分组成并不相同。

　　本研究以白麻叶和罗布麻叶分别制备了提取物及精制物APLE、APLP、AVLE和AVLP，对比研究了4种样品的化学成分及抗炎活性。UPLC/Q-TOF/MS分析从4种样品中鉴定出的化学成分有97个，主要是黄酮、黄酮糖苷和黄烷酮。白麻叶和罗布麻叶的共有化学成分有82个，占鉴定总数的85%，说明二者化学成分同中有异，与文献报道基本一致。同时，本研究也发现白麻叶相比罗布麻叶具有更多的特征成分，比如，白麻叶含有白麻苷、根皮苷、芒柄花苷和异补骨脂素等11个特征成分，罗布麻叶中仅有木犀草素7- O -β- D -葡萄糖苷酸等4个特征成分。为了进一步明确化学成分差异，本研究选择鉴定出的5个黄酮类成分以HPLC检测了含量。结果表明，除了白麻苷是白麻叶样品的特征成分之外，其余4个黄酮类成分在罗布麻叶样品中的含量都更高，并且在精制物中的含量均明显高于提取物，说明精制实现了黄酮类成分的富集。此外，AVLE中芦丁、异槲皮苷的含量分别是白麻叶提取物APLE的15.78、1.50倍，AVLP中芦丁、异槲皮苷、金丝桃苷和紫云英苷的含量分别是APLP的30.37、1.75、8.64和1.58倍。即白麻叶和罗布麻叶不仅有化学成分的组成差异，而且在共有化学成分的含量上也有较为明显差别。

　　急性毒性实验中，2种药材的提取物经过精制并未引起明显急性毒性反应，并且最大耐受剂量折算生药量均是提取物的2倍以上，说明在富集黄酮类成分的同时保证了较好的安全性。采用小鼠肉芽肿实验研究抗炎活性发现，4种样品仅有APLP对肉芽肿小鼠表现出显著的抗炎活性，并能显著降低血清组胺和5-羟色胺水平，说明精制工艺实现了抗炎活性成分的富集，黄酮类可能是白麻叶中的主要抗炎活性成分。组胺和5-羟色胺都属于血管活性胺，有致炎作用。组胺主要存在于嗜碱性粒细胞和肥大细胞，既能舒张血管，又能使血管内皮细胞收缩，加大内皮细胞间间隙，引起血管通透性增加 ［28］，使大分子物质渗出，导致局部充血水肿。5-羟色胺主要来自肠嗜铬细胞、肥大细胞和血小板，具有与组胺类似的作用 ［29］。本实验结果说明，APLP可能通过调节组胺和5-羟色胺的释放减轻局部的渗出反应，从而发挥抗炎作用。下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴对多种炎症反应有调节作用，如果药物兴奋该轴，可以加快甾体激素合成，发挥抗炎作用 ［30］。PGE 2是炎症反应的重要介质，能够扩张血管、致热和致痛，并通过加强组胺和缓激肽的效应增强血管通透性及其他趋化因子的作用，使得白细胞向炎症部位聚集，引起水肿、充血等炎症反应症状 ［31］。因此，本研究还检测了肉芽肿小鼠的肾上腺指数和血清PGE 2含量。但是，4种样品对肾上腺指数无显著影响，这可能与它们的作用都不依赖于下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴有关。与预期不同的是，白麻叶样品和罗布麻叶样品对PGE 2的调节作用不同，即白麻叶样品一定程度上下调了PGE 2水平，这与其抑制组胺的作用一致。罗布麻叶样品不仅未对肉芽肿小鼠表现出明显抗炎活性，而且还提高了PGE 2含量。这与武炜等 ［16］的报道不完全一致，该研究发现罗布麻叶水煎剂可以抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀、醋酸引起的小鼠腹腔毛细血管通透性增加、角叉菜胶所致小鼠足肿胀，并降低炎性组织中的PGE 2含量，造成这一结果的原因可能与检测样本不同和实验样品制备方法不同有关，后续还需要进一步确认具体原因。本研究结果至少说明，化学成分的差异会引起白麻叶和罗布麻叶药理活性的不同，并且二者对一些炎症介质还表现出不同调节作用。

　　本研究以HPLC法检测含量的5个黄酮类成分中，除了白麻苷之外都已被证实具有抗炎活性。金丝桃苷具有抗炎镇痛作用 ［32］；芦丁可以调节炎症因子水平 ［33］；异槲皮苷能有效预防急性结肠炎 ［34］；紫云英苷可能通过抑制Toll样受体4（TLR4）介导的核因子κB（NF-κB）和丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路，抑制脂多糖诱导的小鼠乳腺上皮细胞炎性反应 ［35］，还可以通过激活过氧化酶活化增生受体γ（PPAR-γ）抑制白细胞介素-1β（IL-1β）诱导的NO、PGE2产生 ［36］。但是，这4种成分含量高的罗布麻叶样品相比白麻叶样品在抗炎活性方面反而更弱，因此，特征成分白麻苷是否具有抗炎活性需要确认，并且白麻叶中是否存在尚未被发现的抗炎成分还有待研究。

　　来 源：张娟，冯春艳，卿德刚，徐晓琴，孙宇．白麻叶和罗布麻叶的化学成分与抗炎活性比较研究 [J]. 药物评价研究, 2023, 46(4): 711-720 .返回搜狐，查看更多